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慢瞏景装技术服务项目
1 .服务概述
        慢瞏荆Lentivirus)是以HIV-1(人类免疫缺陷I型瞏荆┪基碻⒄蛊鹄吹幕因治疗载体可以将外源基因或外源的shRNA有效地整合到宿主染色体上从而达到良好的基因治疗效果.区别于1般的逆转录瞏舅对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力因此它可以有效地感染包括神经块细胞 .肝细胞 .心肌细胞 .肿瘤细胞 .内皮细胞 .干细胞等于内的几乎所有的哺乳动物细胞并且感染效率非常高是传统质粒转染方法的数倍甚至数10倍能够比较方便快捷地实现目的基因或目的shRNA的长期 .稳定表达是目前较受欢迎的基因治疗和基因修饰细胞治疗研究工具于体外实验及体内实验的研究中慢瞏菊于获得越来越广泛的应用.
        爱体育生物采用第3代重组慢瞏景装系统制备瞏究帕8锰装装系统具有较高的感染性和安全性能瞏局票杆必需的块件序列被拆分到4个质粒当中分别是:11个编码目的基因的慢瞏颈泶镏柿#22个包装质粒(pLP1 .pLP2).其中1个质粒编码GagPol, 另外1个质粒编码Rev31个编码包膜蛋白的质粒(pLP/VSVG).将上述质粒共同转染到293T细胞中即可生产出携带目的基因的重组慢瞏究帕R渤莆自我失活VSV-G假型慢瞏居诒Vざ阅康南赴的高感染能力的同时也具有更好的安全性.
第3代慢瞏景装辅助质粒示意图
第3代慢瞏窘峁故疽馔

2 .服务内容
1. 构建慢瞏驹靥迨褂玫3代慢瞏景装转染293T细胞.
2. 基因过表达慢瞏镜闹票福
3. 基因沉默shRNA慢瞏镜闹票.
4. 瞏敬炕并进行滴度确认.

3 .服务优势
1. 采用第3代4质粒包装系统具有更高的安全性;
2. 获得的慢瞏镜味雀呔过浓缩后可提获得滴度≥108TU/mL的慢瞏救芤海
3. 可选择是否带有荧光报告基因(GFP .Cherry等)和药筛标记基因(Puro .Neo等);
4. 慢瞏镜纳产于cGMP实验室中进行遵循严格的质量控制标准确保生产的慢瞏菊确可靠.

4 .服务示例(以携带PSK2基因的重组慢瞏局票肝例)
1PSK2基因慢瞏颈泶镏柿9菇
3 pLVX-CMV-GFP-PSK2质粒酶切鉴定图
2GFP-PSK2慢瞏镜募觳
不同稀释倍数的GFP-PSK2慢瞏靖腥293T细胞48小时后的显微拍摄图
不同稀释倍数的GFP-PSK2慢瞏靖腥293T细胞48小时后细胞中PSK2基因表达的实时定量 PCR 曲线图
4shRNA慢瞏净因沉默效果的检测
两种shRNA慢瞏靖腥5637细胞48小时后细胞中FRS2基因表达western结果
 
5 .服务价格及周期
服务编号 服务项目 提供规格 价格 服务周期
RS001-1 目的基因过表达慢瞏颈泶镏柿9菇 500ng/μL, 100μL   1-2
RS001-2 目的基因沉默的shRNA慢瞏局柿9菇 500ng/μL, 100μL   1-2
RS001-3 目的基因过表达慢瞏局票 108TU/mL, 1mL   3-4
RS001-4 目的基因沉默的shRNA慢瞏局票 108TU/mL, 1mL   3-4
 
6 .技术服务流程
1. 用户下载并填写慢瞏景装技术服务协议书发送至service@morecell.com.cn.
2. 双方确认并签订技术服务协议书按照协议内容进行技术服务.

7 .客户须知
1. 如客户所需包装的目的基因由客户提供客户提供需过表达或沉默的基因/蛋白相关信息(包括基因名称 .NCBI编号 .CDS区序列 .目的基因所于载体图谱 .酶切位点 .测序结果等等);
2. 客户应对所提供的材料及信息负责如因客户提供的材料及信息不准确而引起的实验延误或经济损失由客户承担.

8 .交付结果
1. 含目的基因序列或基因沉默shRNA序列的慢瞏颈泶镏柿#≥500ng/μL100μL
2. 含目的基因序列或基因沉默shRNA序列的慢瞏救芤海≥108TU/mL1mL);
3. 阴性对照慢瞏救芤海≥108TU/mL1mL
4. 完整的实验报告.


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爱体育英文解释:The average child takes in 21 teaspoons a day, the AHA saysTsien (1952-2016) got his Clarivate citation prize of chemistry in 2008, before he co-won the Nobel honor in chemistry at the same year, with Osamu Shimomura and Martin Chalfie, for the discovery and development of the green fluorescent protein (GFP)The couple found employment quickly at Hefei University and began teaching Korean the next year
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